造血干细胞移植研究所在Leukemia杂志发表研究论文

发布者:陈志欣发布时间:2019-10-28浏览次数:10

2019年10月,造血干细胞移植研究所在Leukemia杂志以研究论文的形式发表了关于靶向Igβ的CAR-T治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)的最新研究成果“T cells redirected against Igβ for the immunotherapy of B cell lymphoma” ,移植所蒋东鹏博士和血液科田孝鹏博士是该文的共同第一作者,吴德沛教授和储剑虹教授是该文的共同通讯作者。该项研究展示了靶向Igβ的CAR-T细胞在体外具有特异性杀伤表达野生型或突变型Igβ的B-NHL细胞系和原代B-NHL患者肿瘤细胞的能力。并且在两种B-NHL小鼠异种移植模型中,靶向Igβ的CAR-T细胞拥有和靶向CD19的CAR-T细胞比肩的肿瘤清除效率和扩增潜力,证实了Igβ是CAR-T疗法治疗B-NHL合适的靶点。

非霍奇金淋巴瘤(NHL)是淋巴造血系统常见的肿瘤类型,临床上B细胞来源的NHL占比超过70%,常见的亚型是弥漫性大B细胞淋巴瘤 (DLBCL) , 占25%~35%, 滤泡性淋巴瘤 (FL) 约20%, 及套细胞淋巴瘤 (MCL) 6%~8%。近年来,对B-NHL患者的治疗已经从传统化疗演变为多种靶向药物联合化疗, 虽然总体生存较之前有明显改善,但仍有大约40%的患者发生复发或耐药的情况。 这类患者通常预后差, 生存时间短, 治疗十分困难。CAR-T疗法通过赋予患者自体的T细胞靶向识别肿瘤相关抗原(TAA)的能力,从而达到特异性杀伤肿瘤细胞的目的。当前CAR-T疗法治疗B-NHL最常使用的靶点是CD19,然而治疗过程中往往因为肿瘤细胞CD19抗原表达下调或丢失而最终导致治疗失败,因此探究其他靶向治疗的靶点仍十分必要。

Igβ是B细胞抗原受体复合物(BCR)的组成部分,与Igα组合在一起参与BCR激活的信号转导。Igβ在多种B-NHL亚型中高表达,且在疾病的进展和复发过程中表达水平保持相对稳定。在活化细胞样弥漫性大B细胞淋巴瘤(ABC-DLBCL)患者中,Igβ 常常发生突变,导致NF-κB信号通路的慢性激活,为肿瘤细胞提供持续的扩增信号,对肿瘤细胞的生存和扩增十分重要。

本项研究发现,Igβ阳性的靶细胞会刺激靶向Igβ的CAR-T细胞产生强烈的抗肿瘤效应:包括上调激活分子CD69/CD107a,分泌大量的IL-2、IFN-γ、TNF-α,上调Granzyme-B表达,大量扩增并最终杀伤肿瘤细胞。这种抗肿瘤效应依赖于肿瘤细胞表达有野生型或者突变的Igβ分子。并且体外实验表明靶向Igβ的CAR-T细胞能够对B-NHL患者来源的肿瘤细胞产生显著的抗肿瘤效应。在播散型和皮下型的两种小鼠B-NHL异种移植模型中,靶向Igβ的CAR-T细胞具有和靶向CD19的CAR-T相同水平的体内抗肿瘤效应,治疗组小鼠的生存时间显著延长,小鼠外周血、脾脏、骨髓中的肿瘤细胞明显减少,二轮CAR-T输注10天后依然能在小鼠体内检出CAR-T的存在。小鼠体内实验中,靶向Igβ的CAR-T细胞扩增能力及肿瘤浸润能力与靶向CD19的CAR-T水平相当。另外,为了提高靶向Igβ的CAR-T疗法的安全性,可能需要在必要时快速清除大部分Igβ CAR-T。采用的方案是在靶向Igβ的CAR表达载体中引入了一种可诱导的自杀基因(icaspase-9),在小分子药物AP1903的诱导下,检测到24小时内超过95%的CAR-T细胞发生凋亡。

造血干细胞移植研究所成立于2014年3月,2017年搬入独墅湖校区706号楼5楼,目前拥有研究团队14人。研究所以临床应用为导向,以血液学和造血干细胞移植相关分子遗传学、免疫学、出凝血、细胞治疗为研究方向,近年来承担国家自然科学基金重点项目、面上及青年项目9项,在Advanced Material、Leukemia、Cancer Research等杂志上发表多篇有影响力的论文,培养博士及硕士研究生9名,其中一人获得江苏省优秀博士论文。今后,研究所将继续围绕血液学基础与临床转化这一主题,严谨求实、协同创新,力争产出更优异的成果。

附原文摘要:CD19-redirected CAR-T immunotherapy has emerged as a promising strategy for treatment of B cell lymphoma, however, many patients often relapsed due to antigen loss. Therefore, it is urgently needed to explore other suitable antigens targeted by CAR-T cells to cure B cell lymphoma. Igβ is a component of the B cell receptor (BCR) complex, which is highly expressed on the surface of lymphoma cells. In this study, we engineered T cells to express anti-Igβ CAR with CD28 costimulatory signaling moiety and observed that Igβ-CAR T cells could efficiently recognize and eliminate Igβ+ lymphoma cells both in vitro and in two different lymphoma xenograft models. The specificity of Igβ-CAR T cells was further confirmed through wild type or mutated Igβ gene transduction together with Igβ-specific knockout in target cells. Of note, both the in vitro and in vivo effect of Igβ CAR-T cells was comparable with that of CD19 CAR-T cells. Importantly, Igβ CAR-T cells recognized and eradicated patient-derived lymphoma cells in the autologous setting. Lastly, the safety of anti-Igβ CAR-T cells could be further enhanced by introduction of the inducible caspase-9 suicide gene system. Collectively, Igβ-specific CAR-T cells may be a promising immunotherapeutic approach for B cell lymphoma.